Hepcidin Là Gì

  -  

Cùng Cẩm Nang giờ Anh tham khảo nội dung bài viết “Hepcidin là gì” dưới nhé!

Trục Hepcidin / Ferroportin kiểm soát và điều chỉnh sự tăng sinh của những tế bào cơ trơn hễ mạch phổiTháng hai 2021

*

Đối tượng

Tim mạchBệnh mạch máu

trừu tượng

Các nghiên cứu và phân tích đã được triển khai để kiểm tra ngẫu nhiên vai trò nào đối với trục hepcidin / ferroportin trong các phản ứng tăng sinh của các tế bào cơ trơn hễ mạch phổi của con fan (hPASMCs). Số đông phát hiện trọn vẹn mới kỳ lạ đã chứng tỏ sự hiện hữu của ferroportin vào hPASMC. Điều trị Hepcidin gây nên sự tăng sinh của các tế bào này rất bao gồm thể bằng cách liên kết cùng với ferroportin dẫn mang đến nội hóa cùng giữ fe của tế bào. Hàm lượng sắt trong tế bào tạo thêm khi điều trị hepcidin. Ổn định biểu hiện và buổi giao lưu của ferroportin thông qua can thiệp với phòng thể đơn dòng trị liệu LY2928057 đảo ngược sự tăng sinh với tích lũy sắt của tế bào. Ngoại trừ ra, điều trị IL-6 đã có tìm thấy để tăng tốc sự tăng sinh với tích lũy sắt trong hPASMC; can thiệp với LY2928057 đã ngăn ngừa phản ứng này. IL-6 cũng được tìm thấy để tăng phiên mã hepcidin cùng giải phóng trường đoản cú hPASMC cho thấy thêm phản ứng auto tiềm tàng. Tích lũy fe qua trung gian Hepcidin hoặc IL-6 góp phần tăng sinh vào hPASMC; ferroportin qua trung gian bài tiết sắt tế bào tiêu giảm sự tăng sinh. Huyết nhan sắc tố cũng gây nên sự tăng sinh của hPASMC; trong các phát hiện new khác, CD163, thụ thể hemoglobin / haptoglobin, đã có được tìm thấy trên các tế bào này và cung cấp một phương tiện cho sự hấp thu fe của tế bào thông qua hemoglobin. Il-6 cũng rất được tìm thấy để kiểm soát và điều chỉnh CD163 trên những tế bào này. Những dữ liệu này góp thêm phần hiểu rõ hơn về việc làm thay nào sự phá vỡ cân bằng nội môi sắt có thể gây ra sự tái sản xuất mạch máu, chẳng hạn như trong tăng tiết áp cồn mạch phổi.

Bạn đang xem: Hepcidin là gì

Giới thiệu

Hepcidin là 1 hormone peptide nhỏ dại (25 axit amin) chịu trách nhiệm chính trong bài toán điều hòa cân bằng nội môi sắt 1 . Đầu tiên được xác định trong nước tiểu, hepcidin đa phần được sản xuất vì tế bào gan 2 và khi được gửi vào lưu lại thông rất có thể tương tác với hóa học xuất khẩu fe tế bào hoạt động ferroportin, khiến nó bị nội tiết, cho nên vì thế ngăn chặn sự bay ra của sắt với khuyến khích duy trì sắt của tế bào 3 . Hiện tại hepcidin cùng ferroportin thay mặt cho những cơ quan làm chủ duy tuyệt nhất được biết đến về xuất khẩu sắt tế bào. Ferroportin được thể hiện chủ yếu trong số tế bào liên quan đến sự hấp thu sắt (từ cơ chế ăn uống) và cân bằng nội môi; ví dụ bao gồm tế bào ruột non, đại thực bào với tế bào gan.

Biểu hiện Hepcidin được điều chỉnh bởi độ đậm đặc và siêu thị sắt trong ngày tiết tương; sự điều hành và kiểm soát phiên mã này được tạo điều kiện bởi thụ thể protein hình thái xương (BMPR) kết hợp với con mặt đường truyền biểu lộ SMAD 4 . Điều quan lại trọng, lây truyền trùng với viêm cũng điều chỉnh quá trình tổng hòa hợp hepcidin, một phản nghịch ứng đáng chú ý nhất liên quan đến hoạt hóa IL-6 của tuyến đường JAK / STAT 5 . Công dụng hạ mặt đường huyết, được diễn đạt là thiếu máu bởi viêm, giúp giảm bớt độc lực vi sinh vật dụng (xem xét vào 6 ). Hậu quả tương quan đến việc tăng lưu trữ sắt có thể bao gồm thiếu hồng ước và rối loạn công dụng tế bào liên quan đến tích lũy sắt dư vượt 7, 8 . Về vấn đề này, sắt cũng là 1 trong yêu cầu thiết yếu cho sự tăng sinh tế bào; khi gồm sẵn thừa quá, một tâm lý tăng sinh được khuyến khích 1, 7, 9 . Dìm thức hiện tại cho thấy thêm rằng hầu như các một số loại tế bào biểu đạt rất ít hoặc không có ferroportin bởi sắt chỉ được sử dụng cho các yêu cầu thương lượng chất và vày đó không cần phải xuất khoáng sản này. Tuy nhiên, các nghiên cứu mới vẫn nổi lên chỉ ra thể hiện và hoặc hiện tượng của ferroportin cùng hepcidin liên quan đến sự lưu giữ sắt trong những tế bào thuộc những loại ung thư không giống nhau 10, 11, 12 với việc giữ fe có liên quan đến sự sống cùng tăng sinh của tế bào, vày đó cho thấy thêm tầm quan trọng của trục này trong căn bệnh tăng sinh.

Tăng huyết áp rượu cồn mạch phổi (PAH) là một quá trình bệnh trong số đó cân bằng nội môi fe bất thường cũng sẽ được liên quan mang đến 13 cùng dư vượt hepcidin đã chứng tỏ 8 . Nó được đặc thù bởi sự tăng sản khu vực của những thành phần cơ trơn cùng tế bào nội mô của mức độ đề kháng, các tiểu động mạch phổi tiền mao mạch. Được nghe biết như 1 căn bệnh hi hữu gặp, PAH được phân nhiều loại thành vô căn, dt hoặc những dạng dẫn cho kết phù hợp với các tình trạng vắt thể, chẳng hạn như mô links hoặc bệnh dịch tim bẩm sinh khi sinh ra 14 . Đột biến đổi gen, và đặc biệt là những bỗng biến liên quan đến BMPR II sẽ nhấn mạnh phần đông các trường thích hợp di truyền với một tỷ lệ đáng kể các trường hợp lẻ tẻ của PAH 15 vô căn. Viêm rất có thể là mối liên hệ phổ phát triển thành giữa bộc lộ BMP bị rối loạn và mất sắt; quan trọng là IL-6 tiết tương được nuôi ở người bệnh mắc PAH 16 . Một biện pháp hấp dẫn, tăng kỹ năng tự trị qua trung gian bởi hành vi lysosomal (trong kia BMPR-II và ferroportin phần lớn bị thoái hóa) đã được ghi nhấn trong PAH 17, cho thấy thêm mối liên hệ với vấn đề xử lý sắt đã ráng đổi.

Xem thêm: Wibu Key Là Gì ? Wibu Có Khác Otaku Wibu Key Là Phần Mềm Gì

Đối với mối cung cấp sắt cho sự hấp thu của tế bào, điều này rất có thể sẽ được hỗ trợ thông qua các cơ chế qua trung gian thụ thể transferrin-1. Tuy nhiên, sự công nhận gia tăng rằng hemoglobin tự do có tương quan đến PAH 18, không tồn tại kiểu hình căn bệnh tan ngày tiết cổ điển, hoàn toàn có thể gợi ý các con đường bổ sung để thu dìm sắt bởi các tế bào quan trọng phổi.

Do đó, nghiên cứu và phân tích này vẫn được tiến hành để review liệu có ngẫu nhiên vai trò nào đối với trục hepcidin / ferroportin trong số phản ứng tăng sinh của những tế bào cơ trơn hễ mạch phổi. Mục tiêu của nghiên cứu và phân tích là cha lần. Đầu tiên, để trình bày lần trước tiên sự hiện hữu của protein xuất khẩu sắt, ferroportin trong các tế bào này. Thiết bị hai, để điều chỉnh thể hiện / buổi giao lưu của ferroportin trong số tế bào này để review mọi ảnh hưởng tiếp theo so với các bội nghịch ứng tăng sinh. Sản phẩm ba, để đánh giá ngẫu nhiên vai trò nào so với hemoglobin thoải mái trong sự tăng sinh và những cơ chế tiềm năng cho sự hấp thu của tế bào. Những nghiên cứu này hoàn toàn có thể cung cấp cái nhìn sâu sắc về phương châm tiềm năng của cân bằng nội môi fe bị phá tan vỡ trong câu hỏi tu sửa mạch máu, như quan tiếp giáp trong PAH.

Các kết quả

Ferroportin được thể hiện bằng hPASMC với được điều hòa bởi vì hepcidin

Ferroportin mRNA và biểu lộ protein được thể hiện trong số tế bào cơ trơn hễ mạch phổi của con tín đồ (hPASMCs) (Hình 1). Biểu thị mRNA cơ bản ferroportin đã có phát hiện trong những hPASMC kiểm soát. Điều trị hPASMC bằng hepcidin (1 Phag / ml) trong 2, 5 giờ ko có ảnh hưởng đáng nói đến mức độ thể hiện mRNA (Hình 1A). đối chiếu Western blot lysates từ các hPASMC kiểm soát cho thấy một dải giao động 50 kD khớp ứng với ferroportin khi đối chiếu với các lysate ruột tín đồ tiêu chuẩn chỉnh (Hình 1 B). Một ELISA có độ nhạy cảm cao sẽ được thực hiện để định lượng mật độ ferroportin. Mật độ protein ferroportin cơ bản đã giảm rõ rệt 24 giờ sau khoản thời gian điều trị bằng hepcidin, cho thấy thêm cơ chế điều hành và kiểm soát điều hòa sau dịch mã (Hình 1C). Rộng nữa, hóa mô miễn dịch theo sau bằng kính hiển vi đồng tiêu đã chứng tỏ sự định vị bề mặt tế bào cũng tương tự sự phân bố nội bào của ferroportin trong các tế bào không được kích mê thích (Hình 1 D, tấm trên). Điều trị Hepcidin tạo ra sự biến hóa trong phân phối ferroportin khỏi bề mặt tế bào, hướng tới nội địa hóa có dấu lấm chấm, gợi ý về sự sinh ra mụn nước (Hình 1 D, tấm dưới). Size của những cơ quan gồm dấu này chuyển đổi từ 0, 51111M, cân xứng với size của lysosome, cho biết một địa điểm tiềm năng cho sự thoái hóa của ferroportin nội bào. Liên quan đến các phát hiện tại này, trong những nghiên cứu ban sơ sử dụng các mẫu phổi từ bỏ các mô hình chuột của PAH (monocotaline với sugen hypoxia), cường độ nhuộm ferroportin khuếch tán khôn xiết thấp vẫn được chú ý thấy trong các tế bào cơ trơn, ngoài ra còn gồm một vài ba tế bào nhuộm dạn dĩ trong mẫu mã moncrotaline, nhiều tài năng là bạch cầu đối kháng nhân. Ngoài vấn đề chỉ ra một vài sự hiện diện của ferroportin trong các tế bào có liên quan này, không thể lý giải thêm hồ hết phát hiện tại này. Mặc dù nhiên, về sự việc này đã tất cả sự sút rõ rệt về nhuộm ferroportin sinh sống sugen hypoxia lách (kiểm thẩm tra dương tính) khi so sánh với lách kiểm soát, lưu ý về phản ứng hepcidin thế giới trong mô hình PAH này, xem dữ liệu bổ sung.

Xem thêm: Socnhi - Cong Vien Game

*

Ferroportin được thể hiện bằng hPASMC và được điều hòa bởi hepcidin. Những hPASMC kết hợp được ( A ) được cách xử lý giả hoặc được xử lý bởi 1 gang / mL hepcidin vào 2, 5 giờ với tổng số RNA được phân tách xuất bằng bộ RNeasy, cDNA được tổng hợp bằng cách sử dụng mồi oligo-dT với RT-PCR được thực hiện bằng cách sử dụng màu xanh lá cây FBR mồi và-actin là gen giữ nhà. Những giá trị được tiếp tục chuẩn chỉnh hóa khi các lần thay đổi đối với các ô không được điều khiển tại thời gian 0. N = 4 ( B ) được cách xử lý giả trong 24 giờ, những tế bào được ly giải cùng tổng số protein được phân tách xuất, định lượng bởi xét nghiệm của Warren với 40 proteing protein được phân tách bóc trên 10% SDS-PAGE với được chuyển vào màng nitrocellulose. Cách thức làm mờ phương Tây đã làm được thực hiện bằng cách sử dụng IgG chống thỏ làm IgG chủ yếu và dê kháng chuột kết hợp với peroxidase củ cải ngựa chiến làm kháng thể đồ vật cấp. Lysates đường tiêu hóa của con bạn (Abcam) vẫn được áp dụng như là kiểm soát điều hành tích cực. N = 3 ( C ) hoặc được xử trí giả hoặc được điều trị bằng 1 gang / mL hepcidin trong 24 giờ, những tế bào bị ly giải với tổng số protein được chiết xuất. Biểu hiện Fpn đã có định lượng bằng cách sử dụng cỗ ELISA (BlueGene Biotech) cùng được chuẩn chỉnh hóa thành tổng protein được mong tính bởi vì thuốc demo Bradford. N = 4 ( D ) Hình ảnh đồng duy nhất của hPASMC được trồng bởi (tấm bên trên cùng) hoặc (tấm dưới cùng) được xử lý bằng 1 gang / mL hepcidin trong 20 Hay22 h cùng nhuộm miễn dịch với phòng thể chống Fpn của thỏ và phòng thỏ chống thể thứ cấp cho IgG được đính thêm thẻ Alexa-568. Những tế bào liên tiếp được chống lại với DAPI với hình ảnh được chụp bởi kính hiển vi đồng tiêu Leica LSM 510. Thanh tỷ lệ = 10 đỉnh; N = 5. Bài kiểm tra t của sinh viên đã được thực hiện; ** p. 5 và vị đó, cân đối nội môi sắt. Điều trị IL-6 của hPASMC đã chứng tỏ rõ ràng rằng cả mRNA và bài trừ protein của hepcidin số đông tăng đáng chú ý theo hình thức sau 2 tiếng và 24 tiếng (Hình 2A, B). Được xác minh là chuyển đổi lần so với gen-actin, bộc lộ hepcidin tăng 3, 3 lần với 10 ng / ml IL-6. Ngược lại, 48 giờ sau khoản thời gian điều trị IL-6, protein ferroportin đã giảm đáng kể 48% so với giá trị đối hội chứng (p

*

IL-6 tăng biểu hiện hepcidin cùng ferroportin được kiểm soát và điều chỉnh xuống trong hPASMC. Các hPASMC kết hợp được giải pháp xử lý giả hoặc xử lý bằng 10 ng / mL IL-6 ( A ) trong 2, 5 giờ và tổng RNA được phân tách xuất bằng bộ RNeasy, cDNA được tổng hợp bằng cách sử dụng mồi oligo-dT với RT-PCR được thực hiện bằng phương pháp sử dụng màu xanh lá cây của SYBR Hamp-1) mồi và-actin là gen giữ lại nhà. Các giá trị được tiếp tục chuẩn hóa khi các lần thay đổi đối với các ô không được điều khiển tại thời gian 0. N = 4 ( B ) vào 24 giờ, hóa học siêu lọc media được tích lũy và bài trừ hepcidin được định lượng bởi bộ ELISA (Hệ thống R & D). N = 4 ( C ) trong 24 giờ đồng hồ tế bào bị ly giải với tổng số protein được phân tách xuất. Biểu lộ Ferroportin đã làm được định lượng bằng cách sử dụng cỗ ELISA (BlueGene Biotech) cùng được chuẩn hóa thành tổng protein mong tính bằng thuốc test của Bradford. N = 4 ( D ) Hình ảnh đồng tốt nhất của hPASMC được trồng bằng (bảng trên cùng) hoặc (bảng dưới) được cách xử trí với 10 ng / mL IL-6 trong trăng tròn Hay22 h và nhuộm miễn kháng với kháng thể chống Fpn của thỏ và kháng dê kháng thể thứ cấp IgG được thêm thẻ Alexa-568. Các tế bào thường xuyên được ngăn chặn lại với DAPI và hình ảnh được chụp bởi kính hiển vi đồng tiêu Leica LSM 510. Thanh phần trăm = 10 Pha, N = 5. Bài kiểm tra của sinh viên đã có được thực hiện; ** p.

*

Hepcidin và IL-6 kích thích hợp tăng sinh hPASMCs bị ức chế bởi LY2928057. HPASMC được mạ lên 96 tấm giếng (2500 tế bào / giếng). Sau khi tuân thủ ban đầu, những tế bào đã biết thành bỏ đói trong ngày tiết thanh trong trăng tròn phút 24 giờ trước lúc điều trị trước bằng một mình hoặc ( A ) 1 mậtg / mL hepcidin hoặc ( B ) 10 ng / mL IL-6 trong 24 giờ. Sau đó, những tế bào được tiếp xúc với cùng một μg / mL LY2928057 hoặc môi trường xung quanh một bản thân trong 1, 5 giờ tiếp đến tiếp tục thử thách lặp lại cùng với hepcidin hoặc IL-6 nghỉ ngơi nồng độ hướng dẫn và chỉ định (hoặc chỉ dùng phương tiện truyền thông) vào 24 giờ. BrdU đã được giới thiệu (ở mật độ khuyến nghị ở trong nhà sản xuất) trong 24 giờ đồng hồ nữa trước lúc thu hoạch các tấm. Sự tăng sinh được định lượng bằng bộ ELISA của BrdU bằng kháng thể kháng BrdU-POD. Toàn bộ các cách thức điều trị đang được tiến hành trong cha lần. Tất cả các bài đọc vẫn được chuẩn hóa để điều hành và kiểm soát các tế bào không được điều trị. Dữ liệu hiển thị là ± SEM. N = 4. ANOVA theo sau là bài bác kiểm tra hậu hoc Bonferroni đã có được thực hiện; * p 20 . Vì đó, các thí nghiệm vẫn được tiến hành để xác minh xem liệu khám chữa hepcidin cùng / hoặc IL-6 hữu dụng cho bài toán giữ fe trong hPASMC cùng thứ hai là ví như ổn định thể hiện ferroportin với LY2928057 có thể hạn chế sự tích lũy đó. Bằng cách sử dụng xét nghiệm fe màu, đo tổng lượng sắt (Fe 3+ với Fe 2+ ), không tồn tại sự ngày càng tăng đáng đề cập về sắt trong những tế bào được điều trị bởi hepcidin hoặc IL-6 vào 24 tiếng (Hình 4A, bảng bên trái). Mặc dù nhiên, câu hỏi ủ trước cùng với LY2928057 dẫn đến giảm đáng nhắc nồng độ sắt trong tế bào: 5, 3 lần so với hepcidin và gấp 4, 16 so với IL-6 so với 2, 14 đối với các tế bào không được điều trị (Hình 4A, bảng mặt phải). Điều thú vui là, triển khai các phép đo tương tự như trong 48 giờ cho biết thêm hàm lượng sắt trong tế bào tăng xứng đáng kể: vội 1, 88 lần cùng 2, 72 lần so với các tế bào được điều trị bằng hepcidin cùng IL-6 (Hình 4B, bảng mặt trái) tuy nhiên lượng sắt tế bào rất có thể đo được bớt quá số lượng giới hạn phép đo xét nghiệm trong số tế bào được xử lý trước LY2928057 (Hình 4B, bảng mặt phải). Để cung cấp thêm, cường độ Protein cân bằng sắt 2 (IREB2), chất thay thế cho mức độ sắt, đã giảm trong các tế bào được điều trị bằng hepcidin hoặc IL-6 và đáng kể so với các tế bào được điều trị bằng hepcidin (Hình 4).